Потребность в реактивах
Текущая технология и состав обусловлены выбором :
Виды криопротекторов, Перерасчет состава, Приготовление растворов, Технология заморозки
Потребность в реактивах для перфузии
Для одного пациента нужно 5 л промывочного раствора, 30 л перфузионного (концентрация веществ в 4 раза выше промывочного). Т. е. нужно "35 порций" (используется только для расчёта: 1 порция - на литр промыв. или 1 л. перф. раствора, т. е. 0,25 л КТР. Развес идёт не по отдельным порциям!). Таким образом
Для приготовления промывочного и перфузионного растворов на одного пациента требуется следующее количество реактивов:
| Вещество | формула | потребность, г. | фасовка, кг.? | ~сумма, руб. | |
| 1 | Глицерин | C3H8O3 | 15 л. | 1,26 x 15 | 1805 |
| 2 | Хлорид калия | KCl | 78,4 | 0,8 | 87 |
| 3 | Гидрокарбонат натрия | NaHCO3 | 29,4 | 1 | 75 |
| 4 | Дигидрофосфат калия | KH2PO4 | 34,3 | 0,5 | 75 |
| 5 | Хлорид магния | MgCl2•6H2O | 17,15 | 1 | 60 |
| 6 | Глюкоза | C6H12O6 | 1135,4 | 0,5 | 41 |
| 7 | Маннитол | 45,55 | нет | ??? | |
| 8 | Едкое кали | KOH | ~13 | 0,5 | 42 |
| 9 | Хлорная кислота | HCl | ??? | ??? | ??? |
| 10 | Вода дист. | 20 л. | |||
| 11 | Сухой лёд | 200-300 кг. | |||
| 12 | Обычный лёд | 100-200 кг. | |||
| 13 | Гепарин | 30-40 тыс. ед. | 25 тыс. ед.
в одной 5-мл ампуле. 5 ампул в коробке |
недорого |
Цена одного комплекта (с большим запасом, т. к. всё в стандартной фасовке) - около 2500 рублей (больше всего стоит глицерин - 1800-3000 рублей).
Следует обеспечить запас реактивов для перфузии в Петербурге и Москве для экстренного случая.
Требования к материалам
1. Глицерин
Глицерин: химическая формула - HOCH2CH(OH)CH2OH , внешний вид - прозрачная жидкость без запаха.
По чистоте нам достаточно ХЧ (химически чистый). ЧДА (чистый для анализа, "для спектрофотометрии", "безводный, для молекулярной биологии" и т. д. - никому не нужная роскошь.
Вполне можно использовать водный раствор (напр., "Глицерин 85%, фарм.", "Глицерин, 83.5-88.5 вес.% водный раствор") - его ведь всё равно разводить, а он, думаю, должен быть намного дешевле безводного. При смешивании раствора для перфузии нужно учитывать, что он уже слегка разбавлен, беря его чуть побольше, а воды - чуть поменьше.
2. Маннитол (Маннит).
То же самое. Берём самый дешёвый в расчёте на 1 грамм вещества.
3. Калий хлорид
То же самое; не нужно никакого хлорида серебра и пр. Можно любой раствор, но удобнее, скорее, кристаллический. "Безводный" - совершенно излишне. Его нужно немного, и можно брать, какой есть. Можно даже купить раствор в аптеке. Хранить сухой без доступа воздуха, раствор - в тёмном холодном месте.
4. В файлах натрий гидрокарбонат1-4.htm есть нужный нам реактив ?
Есть под названием "Натрий бикарбонат" (он же натрий двууглекислый, он же питьевая сода). Купить можно в любом магазине бытовой химии или (15 г.) в любой аптеке.
5. Дегидрофосфат Калия это то что в файле Калий фосфат1-2.htm ?
Нет, там именно то, что там написано - фосфат. А нужен дИгидрофосфат (через "И"). Это разные вещества.
6. Едкий калий еще называется гидрооксид калия? Какие еще есть на него названия, ато не нахожу что-то ?
ЕдкОЕ калИ (гидрооксид калия, гидроокись калия).
7. Хлорид калия (Калий хлор, калий хлорид)
8. Гепарин
Ввести 30 тыс. единиц, если вес пациента более 75 кг, то 40 тыс.
Помимо собственно введения - нужно его довольно много добавить в Промывку
Другие цифры CI:
heparin (700 units/kg) = 52500U/75 kg.
washout heparin (10 units/ml) - от объема перфузата.
Прочие реактивы
Индикаторы pH
Для приведения воды к нейтральному состоянию (pH=7.6) может потребоваться щелочь (KOH) или кислота (HCL). Измерения значения pH проще всего проводить не с помощью соответствующих приборов (они требуют калибровки), а с помощью капельного теста - раствор индикатора и таблицу калибровочных цветов можно найти в магазинах, торгующих принадлежностями для аквариумов или бассейнов.
Сухой лед
Расход сухого льда
В неделю может уходить ~20 кг сухого льда. При цене 15 руб/кг в Питере это может составить 500$/год. При цене 30 руб/кг в Москве чуть больше $1000. Возможно, что более совершенная изоляция может снизить расход льда.
Азот
Какую конкретно номенклатуру выбрать (оптимальное соотношение объема/цены)?
см. Конкретные позиции по реактивам в конкретных фирмах
Где брать?
см. Конкретные позиции по реактивам в конкретных фирмах
Некоторые из этих реактивов можно купить в рецептурных отделах аптек. Однако не всегда там есть всё, что нужно и в достаточном количестве. В Москве всё, кроме маннитола и воды есть в "Химмед" и "Баум-люкс" (см. Поставщики материалов). Маннитол должен быть в других местах. Продают они обычно юр. лицам по доверенности.
На нашем сайте старая пропись отмывочного раствора, который использовался и как транспортный раствор для глицеринового перфузата. Сейчас мы прекратили использовать глицериновую технологию и сменили пропись раствора. Я привожу несколько более простой вариант старого раствора, которым мы в основном пользовались. Он не содержит маннитола и вместо MgCl2 (если его нет) можно использовать MgSO 4.
Composition of washout and vehicle solution in grams/L
KCl 2.24
NaHCO3 0.24
KH2PO4 0.98
MgCl2x6H2O 0.41
(or MgSO4x7H2O 0.46)
Glucose 41.4
(without mannitol)
To adjust pH of the solution to 7.6, dissolve 1 g KOH in 2 ml of distilled water and add of this to every liter of solution.
Глицериновая технология технология замораживания хуже, чем этиленгликоливая. Бен Бест предложил, по просьбе некоторых клиентов, перфузировать не голову, но и тело. Я разработал для этого этиленгликовую технологию.
Умееш ли ты приготавливать перфузаты? Например, как ты будешь приготавливать 75% глицериновый перфузат? Это важно.
Это от Пичугина
Запас
Экселевская таблица ниже:
см. также Виды криопротекторов, Перерасчет состава, Приготовление растворов, Технология заморозки
